Nuevas estrategias para mejorar la eficiencia del semen sexado en producción in vitro de embriones bovinos

Abstract

El objetivo de esta tesis fue el de optimizar el uso de semen sexado en embriones bovinos producidos in vitro (PIVE). Para ello se realizaron tres estudios con el fin de evaluar: diferentes medios de fecundación in vitro (FIV): M199-FERT, fluido oviductal sintético (SOF-FERT) y Tirodes-albúmina-lactato-piruvato (TALP) (Estudio 1); agentes hiperactivadores de la motilidad espermática y tiempos de fecundación (Estudio 2) y mini-coloides de densidad variable (Estudio 3). En el Estudio 1, complejos ovocito-cumulus (COCs) fueron fecundados con semen sexado. Se analizó el clivaje, polispermia, formación de blastocitos, calidad embrionaria y capacidad de eclosionar. Los resultados mostraron que el medio de fecundación afectó la tasa de clivaje, desarrollo embrionario, calidad y capacidad de eclosión. En el Estudio 2, factores hiperactivadores de la motilidad: cafeína (CA), teofilina (TH) y CA + TH fueron testados al igual que la duración de la fecundación (8 hs versus 18 hs). Los factores hiperactivadores de la motilidad afectaron las tasas de clivaje y desarrollo embrionario, mientras que el acortamiento de la fecundación no afectó la producción embrionaria. Finalmente, en el Estudio 3 se analizaron diferentes mini-coloides de densidad continuos y discontinuos. La tasa de recuperación y viabilidad espermática y la calidad seminal se vio afectada por el tipo de mini-coloides de densidad. La mono-capa de densidad continua al 80% y el medio SOF-FERT combinado con CA + TH resultaron ser la mejor combinación para obtener la mayor tasa de recuperación, viabilidad y calidad espermática, tasa de clivaje, desarrollo embrionario, calidad embrionaria y capacidad de eclosión.