Genotipificación de variantes de beta-caseína bovina mediante ACRSPCR- RFLP = Genotyping of bovine beta-casein variants by ACRS-PCR-RFLP

Abstract

Las variantes de la beta-caseína bovina pueden clasificarse en dos grupos, tipo-A1 y tipo-A2, según el aminoácido que esté presente en la posición 67 de la proteína (His, tipo A1; Pro, tipo A2)1. En los últimos años se ha observado un creciente interés en la producción y comercialización de “leche A2”, debido a las propiedades beneficiosas para la salud humana atribuidas a la variante A22. El objetivo de este trabajo fue determinar la frecuencia de variantes tipo-A1 y tipo-A2 de -caseína en ganado lechero de dos establecimientos. Las variantes de -caseína presentes en el ADN de 1528 vacas de raza Holando fueron determinadas mediante la técnica de ACRS-PCR-RFLP3. Brevemente, se amplificó un fragmento de 316 pb del gen CSN2, creándose un sitio de restricción para la enzima DdeI en el amplicon obtenido. El producto de PCR luego se digirió con las enzimas DdeI y HinfI. La identificación de variantes se realizó mediante electroforesis en geles de agarosa y posterior visualización de los fragmentos obtenidos. Se calcularon las frecuencias alélicas y genotípicas para las variantes tipo-A1 y tipo-A2. Las frecuencias genotípicas fueron de 0,046, 0,497 y 0,457 para A1A1, A2A2 y A1A2, respectivamente, con frecuencias alélicas de 0,274 y 0,726 para las variantes tipo-A1 y tipo-A2, respectivamente. El método utilizado demostró ser confiable para la identificación y diferenciación de variantes de -caseína tipo-A1 y tipo-A2, permitiendo la determinación del genotipo de animales individuales. Los animales pertenecían a dos establecimientos con sistemas de producción de leche distintos y que nunca se seleccionó por variantes de -caseína, por lo tanto, estos resultados permiten brindar a los productores asesoramiento sobre los cruzamientos a realizar en caso de orientar su producción a la comercialización de “leche A2A2”.