Caracterización diagnóstica de las causas infecciosas del aborto bovino

Abstract

El objetivo del presente estudio fue el desarrollo y la aplicación de técnicas diagnósticas mejoradas para aumentar la eficiencia del diagnóstico del aborto bovino. Para ello, se realizó la necropsia de 150 fetos bovinos, provenientes de casos espontáneos de abortos de rodeos para producción de carne y leche. Los fetos fueron remitidos para diagnóstico por veterinarios rurales y de laboratorios de diagnóstico veterinario privados durante los años 2004,2005 y parte de 2006, y se procesaron en los laboratorios del Grupo de Sanidad Animal del INTA Balcarce. En la necropsia de los fetos se identificaron las lesiones macroscópicas; se estimó la edad fetal, el sexo y el grado de autólisis en una escala subjetiva y se recolectaron diversas muestras para análisis histopatológicos e inmunohistoquímicos, cultivo bacteriológico y aislamiento viral. Además se aplicaron técnicas serológicas para identificar anticuerpos de Neospora caninum, vDVB, HVB-1 y finalmente se aplicó la técnica de PCR para diferentes agentes infecciosos. Del total de especimenes, 104 (69,2%) provenían de rodeos para carne y 35 (23,4%) de rodeos lecheros, en 11 fetos (7,4%) no se registró el origen. Setenta y seis (50,6%) fetos fueron machos y 58 (38,6%) hembras mientras que en 16 (10,6%) oportunidades no se consignaron los datos. El 61,0% de los fetos presentó autólisis moderada (grado 2) o severa (grado 3), mientras que en el 22,0% de los casos la autólisis fetal fue leve (grado 1) y en el 24,0% restante no se registraron estos datos. Las edades de gestación de la mayoría de los fetos analizados correspondió al tercer trimestre de la gestación. El diagnóstico etiológico se determinó en 75/150 (50,0%) especímenes siendo las causas más frecuentes las de origen infeccioso (69/150, 46,0%). Las 69 causas infecciosas se diagnosticaron por cultivos microbiológicos (27 causas bacterianas: Campylobacter fetus (14 casos), Brucella abortus (6 casos), Arcanobacterium pyogenes (2 casos), Aeromona hydrophila (1 caso), Listeria monocytogenes (1 caso), Streptococcus alfa hemolítico (3 casos) y Tritrichomonas foetus (2 casos), cultivos virológicos (2 casos vDVB), IFD (11 casos Leptospira spp.), histopatología e IHQ (11 casos de N. caninum) y con el auxilio de la técnica de PCR en 15 fetos (B.abortus: 4 casos, N. caninum: 11 casos) con diagnóstico indeterminado. Por último, un caso de aborto micótico (Aspergillus fumigatus) fue diagnosticado 11 por la presencia de lesiones macroscópicas, histopatológicas y por la observación de las hifas del hongo con la tinción de Grocott. Se analizaron 110 fluidos de cavidades fetales y se obtuvieron títulos al vDVB en 15/110 (13,6%) y al HVB 14/110 (12,7%), respectivamente. La detección de anticuerpos para N. caninum por IFI se logró en 11/94 (11,7%) fluidos fetales. En 6 oportunidades (4,0%) se establecieron causas no infecciosas : malformaciones congénitas (4 casos) y de origen iatrogénico (2 casos). Los casos indeterminados fueron 75/150 (50,0%), de los cuales 39/150 (26,0%) presentaron lesiones histológicas sugestivas de origen infeccioso, mientras que en 34/150 (22,6%) no se observaron lesiones histopatológicas. Se concluye que si bien las causas infecciosas siguen siendo las principales responsables en la etiología del aborto bovino (46,0%), N. caninum fue el agente infeccioso identificado con mayor frecuencia (22/150, 14,6%). La autólisis fetal actuó en detrimento de la eficiencia y sensibilidad de la mayoría de las técnicas diagnósticas utilizadas. Con el auxilio de la técnica de PCR se pudieron identificar 15 casos que presentaban previamente diagnóstico indeterminado por los métodos convencionales, permitiendo mejorar la eficiencia diagnóstica del aborto bovino en un 10,0%.

The main objective of this study was to develope and implement improved diagnostic techniques to increase the efficiency of the diagnosis of bovine abortion. Necropsies were performed on 150 bovine foetuses, from spontaneous cases of abortions belonging to beef and dairy herds. The fetuses were referred for diagnostic from rural veterinarians and private veterinary diagnostic laboratories in the years 2004,2005 and part of 2006, and processed in the laboratories of the Animal Health Group of INTA Balcarce. In the necropsy of the foetuses the lesions were identified, foetal age, sex and degree of autolysis were estimated on a subjective scale and several samples were collected for histopathology, immunohistochemistry, bacteria culture, viral isolation, identification of antibodies against Neospora caninum, BVDV, BHV-1 through serological techniques and finally the PCR technique for different infectious agents. Foetuses belonged to beef (104, 69.2%) and dairy (35, 23.4%) herds, in 11 fetuses (7.4%) the type of herd was unknown. Seventy-six (50.6%) foetuses were male and 58 (38.6%) female while in 16 (10.6%) opportunities were not determined. 61.0% of the foetuses showed moderate (grade 2) or severe (grade 3) autolysis, while 22.0% of cases foetal autolysis was mild (grade 1) and in the remaining 24.0% these data were not recorded. The gestational ages of the most fetuses analyzed corresponded to the third trimester of the pregnancy. The etiologic cause of abortion was determined on 75/150 (50.0%) specimens and the most common causes were infectious (69/150, 46.0%). These 69 infectious cases were diagnosed by microbiological cultures (27 bacterial causes: Campylobacter fetus (14 cases) Brucella abortus (6 cases), Arcanobacterium pyogenes (2 cases), Aeromona hydrophila (1 case), Listeria monocytogenes (1case), Streptococcus alpha hemolytic (3 cases) and Trirtichomoans fetus (2 cases), virological cultures (2 cases BVDV), IFD (11 cases Leptospira spp.), histopathology and IHC (11 cases of N. caninum) and PCR in 15 fetuses (B.abortus: 4 cases, N. caninum: 11 cases) with undetermined diagnosis. Finally a mycotic abortion (Aspergillus fumigatus) was diagnosed by the presence of gross lesions, histopathology and presence of hyphae stained with Grocott. Antibodies to BVDV and HVB were found in foetal fluids in 15/110 (13.6%) and 14/110 (12.7%) specimens respectively. 13 Antibodies against N. caninum by IFA were identified in 11/94 (11.7%) foetal fluids. In 6 (4.0%) opportunities non-infectious causes were established: 4 cases of congenital malformations and 2 cases of iatrogenic origin. When a histopathological examination was performed on 75/150 (50.0%) indeterminate cases, 39 (26.0%) had histologic lesions compatible with infectious agents, while in 34 (22.6%) cases lesions were not observed. Infectious agents were the main causes in the aetiology of bovine abortion (46.0%). However, N. caninum was the most frequently agent identified (22/150, 14.6%). Foetal autolysis reduced the efficiency and sensitivity of most diagnostic techniques used. The PCR technique identified further 15 cases with indeterminate diagnosis by conventional methods, improving the diagnostic efficiency of bovine abortion by 10.0%.