Participación del antiporter NA+/H+ NHX1 de Lotus tenuis en la tolerancia a la salinidad de arabidopsis thaliana

Abstract

Lotus tenuis es una leguminosa forrajera naturalizada en los campos bajos de la Pampa Deprimida. El antiporter vacuolar NHX1 es fundamental en la tolerancia a la salinidad de numerosas especies por ser responsable de la compartimentalización de Na+ en vacuolas. El objetivo de este trabajo fue estudiar los cambios en la tolerancia a la salinidad de Arabidopsis thaliana al expresar el gen NHX1 de L. tenuis (LtNHX1) en forma constitutiva. La región codificante se clonó en el vector pEarleyGate203 y se obtuvieron cinco líneas transgénicas de A. thaliana mediante inmersión floral. La expresión del transgén se confirmó por RT-PCR. Las líneas y el genotipo salvaje (Col 0) se evaluaron en un DCA bajo tres tratamientos: 0, 50 y 100 mM NaCl. A los 28 días se midió el diámetro (D) y el peso seco aéreo (PSA) y se estimó un índice de tolerancia para cada variable (ITD e ITPSA) como el valor de cada planta en sal sobre la media del control. También se midió el contenido de Na+ en raíz y hoja por fotometría de llama. Se realizó ANOVA de dos vías y test de comparaciones múltiples DGC. Cuatro de las líneas transgénicas presentaron mayores ITD e ITPSA que Col 0. Se realizó un nuevo análisis comparativo entre una línea transgénica (L28) y Col 0, disminuyendo la variabilidad de los datos. L28 presentó mayor ITD e ITPSA y se encontró interacción genotipo*tratamiento para PSA y D, con mayores medias de L28 en 100 mM. Además, L28 acumuló más Na+ en hoja. La expresión constitutiva de LtNHX1 incrementó la tolerancia a la salinidad y el aumento de Na+ en hoja indicaría mayor actividad del antiporter.