Estudio comparativo del comportamiento biológico de aislamientos de Haemonchus contortus resistente y susceptibleI a los antihelmínticos en corderos infectados experimentalmente

Abstract

Los parásitos gastrointestinales constituyen una de las principales causas de disminución de productividad en rumiantes. La principal especie parasitaria que afecta a los ovinos, causando importantes pérdidas económicas, es Haemonchus contortus. Su control se ha basado principalmente en el uso indiscriminado de antihelmínticos que generó resistencia a la mayoría de los productos comerciales disponibles. Debido a esta problemática, es necesario estudiar el impacto que tiene dicho fenómeno en la aptitud de este nematodo, ya que existe evidencia, de cambios en su patogenicidad y características parasitológicas. Por tales motivos los objetivos de este trabajo fueron evaluar y comparar aspectos fisiopatológicos y parasitológicos de aislamientos resistente y susceptible de H. contortus sobre corderos inoculados experimentalmente. El ensayo se realizó en la Unidad Integrada Balcarce, Buenos Aires. Se utilizaron 18 corderos de 4-5 meses de edad alojados en corrales, libres de parásitos y separados en tres grupos (n=6). Un grupo se inoculó con 2000 larvas infectivas (L3) de H. contortus resistente (benzimidazoles y lactonas macrocíclicas), otro se inoculó con 2000 L3 de H. contortus susceptible, y el otro se mantuvo libre de parásitos. Se realizó un monitoreo diario de los animales durante 68 días, evaluando parámetros fisiopatológicos y parasitológicos. Diariamente se evaluó el consumo de alimento y agua y se determinó el conteo de huevos de nematodos en materia fecal (HPG). Cada 10 días se tomaron muestras de sangre para evaluar indicadores hematológicos, se registró el peso, condición corporal y FAMACHA©. En forma indirecta se calculó la prolificidad parasitaria. Se evaluó el porcentaje de eclosión de huevos de ambos aislamientos mediante una técnica in vitro. Al final del período experimental se llevó a cabo la necropsia parasitológica de todos los corderos, realizándose el conteo y clasificación de parásitos adultos abomasales (relación hembra:macho y longitud) y la evaluación histopatológica del abomaso. No hubo diferencias significativas (p>0,05) en el peso vivo ni en la condición corporal entre grupos. No se encontró diferencia significativa (p>0,05) entre grupos inoculados en FAMACHA©, pero si con el grupo control. El hematocrito, los glóbulos rojos, la hemoglobina y las proteínas totales mostraron una cinética similar, sus valores cayeron y se diferenciaron significativamente (p≤0,05) en ambos grupos inoculados con respecto al control a partir del día 21 post inoculación. El promedio de HPG fue mayor en el grupo susceptible durante todo el estudio (p≤0,05) comparado con el grupo resistente. La cantidad de huevos/hembra estimada fue similar entre aislamientos al comienzo de la oviposición (alrededor de 8000 huevos/hembra), sin embargo al final de este periodo, hubo diferencias significativas (p≤0,05) con mayor oviposición promedio de hembras resistentes. El peso relativo de abomaso mostró tendencia a ser mayor en grupo susceptible con respecto al control (p=0,06). Se recuperó mayor cantidad de adultos susceptibles (1516) que resistentes (951) (p≤0,05), por lo tanto, el porcentaje de implantación fue mayor en el aislamiento susceptible (75,8%). No hubo diferencia significativa (p>0,05) en la relación hembra:macho, ni en la longitud promedio de los aislamientos. Se encontraron lesiones macroscópicas y microscópicas muy leves en ambos grupos inoculados. Bajo las condiciones del presente trabajo existió un comportamiento diferencial entre los aislamientos de H. contortus utilizados, que podría indicar diferentes estrategias de control según la bionomía particular de cada aislamiento.

Gastrointestinal parasites are one of the main causes of decreased productivity in ruminants. Haemonchus contortus is the main parasitic species that affects sheep, causing significant economic losses. Its control has been based mainly on the indiscriminate use of anthelmintics, which has generated resistance to most available commercial products. Given that there is evidence of changes in its pathogenicity and parasitological characteristics of this nematode, it is necessary to study the impact that this phenomenon has on its fitness. For these reasons, the objectives of this work were to evaluate and compare pathophysiological and parasitological aspects of resistant and susceptible isolates of H. contortus on experimentally inoculated lambs. The trial was conducted at the Balcarce Integrated Unit, Buenos Aires. Eighteen 4-5 month old, parasite-free lambs housed in pens, and separated into three groups (n = 6). One group was inoculated with 2000 infective larvae (L3) of resistant H. contortus (benzimidazoles and macrocyclic lactones), another was inoculated with 2000 L3 of susceptible H. contortus, and the third group remained as parasite-free control. Daily monitoring of the animals was carried out during 68 days, evaluating physiopathological and parasitological parameters, such as consumption of food and water, and faecal egg counts (FEC). Every 10 days blood samples were taken to evaluate hematological indicators, and recording of live weight, body condition and FAMACHA© was carried out. Indirectly parasite prolificacy was calculated. The percentage of egg hatching of both isolates was evaluated by in vitro technique. At the end of the experimental period, the parasitological necropsy of all the lambs was carried out in order to count and classify abomasal adult parasites (female:male relationship and length) and to perform the abomasum histopathological evaluation. No significant differences (p>0,05) were detected in live weight or body condition between the groups. Significant differences (p<0,05) were found for FAMACHA© between the control and the inoculated groups but not between the parasitised groups. Hematocrit, red blood cell count, hemoglobin and total proteins showed similar kinetics, their values decreased and they differed significantly (p≤0,05) in both inoculated groups compared to the control one, from day 21 post inoculation on. Average FEC was higher in the susceptible group throughout the study (p≤0,05) compared to the resistant group. The estimated number of eggs/female was similar between isolates at the beginning of oviposition period (around 8000 eggs/female), but significant differences (p≤0,05) were detected at the end, with higher average oviposition by resistant females. The abomasum relative weight showed a tendency to be heavier in the susceptible group with respect to the control one (p=0,06). More susceptible adults (1516) than resistant ones (951) (p≤0,05) were recovered; therefore, the implantation percentage was higher for the susceptible isolation (75.8%). There was no significant difference (p>0,05) in the female:male ratio, nor in the parasites average length between the two isolates. Very mild macroscopic and microscopic abomasum lesions were found in both inoculated groups. The present work showed a differential behavior between the H. contortus isolates, which could indicate that different parasite control strategies could be applied according to the particular bionomic of each isolate.