Evaluación de la actividad inmunogénica de una vacuna para profilaxis de la anaplasmosis bovina

Abstract

El objetivo de este trabajo fue formular una vacuna criopreservada para la prevención de la anaplasmosis y evaluar su actividad inmunogénica. Se utilizó una vacuna monovalente de 2,5x107 eritrocitos bovinos infectados con Anaplasma centrale, criopreservada en glicerol en dosis de 0,5 ml. Para ello se seleccionaron 20 terneros entre 4-10 meses de edad, libres de anaplasmosis, de un establecimiento ubicado en la Provincia de Corrientes, Argentina. El lote fue dividido en dos grupos iguales, uno recibió la vacuna criopreservada y el otro se utilizó como grupo control sin vacunación. Se tomaron muestras de suero a los 0, 30 y 60 días post-vacunación (dpv) y se evaluó la inmunidad inducida por la vacuna mediante ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA) en suero. A los 15-30-45 y 60 dpv se analizaron muestras de sangre de 3 terneros de cada grupo para la identificación y diferenciación de Anaplasma sp mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR). ELISA resultó negativa para los 20 terneros analizados en el día de la vacunación; a los 30 dpv dos terneros del grupo vacunado resultaron positivos mientras que los terneros del grupo control fueron negativos. A los 60 dpv el 80% de los terneros del grupo vacunado fue positivo al ELISA y dos animales del grupo control resultaron sospechosos. La PCR reveló la presencia de A. centrale a los 60 dpv no solo en los tres terneros del grupo vacunado sino también en los tres del grupo control, hecho que podría atribuirse a la transmisión horizontal por iatrogenia o a través de vectores. A. marginale no fue identificado. La falta de detección de anticuerpos específicos a los 60 dpv en dos terneros vacunados, no analizados por PCR, podría responder a un período de incubación más prolongado, y hubiera requerido un control posterior. Se concluye que la vacuna monovalente de A. centrale criopreservada confirió una inmunidad adecuada para la profilaxis de la anaplasmosis en terneros, resultando una alternativa válida para establecimientos de zonas libres de garrapatas. Se confirmó la ausencia de A. marginale en el rodeo analizado y la transmisión horizontal de la cepa vacunal.

The aims of this work were to formulate a cryopreserved vaccine for the prevention of anaplasmosis and to evaluate its immunogenic activity. A monovalent vaccine of 2.5x107 bovine erythrocytes infected with Anaplasma centrale in a dose of 0.5 ml, cryopreserved in glicerol, was used. Twenty calves were selected, ranging from 4 to 10 months-old, free of anaplasmosis, from an establishment located in the Province of Corrientes, Argentina. The batch was divided into two groups, one received the cryopreserved vaccine and the other was not vaccinated (control group). Serum samples were taken at 0, 30 and 60 days after vaccination (dav), and immunity induced by the vaccine was evaluated by ELISA (enzyme-linked immuno sorbent assay). At 15-30-45 and 60 dav, blood samples were analyzed from 3 calves of each group for the identification and differentiation of Anaplasma sp by polymerase chain reaction (PCR). ELISA was negative for the 20 calves analyzed on the day of vaccination; at 30 dav two calves of the vaccinated group were positive while the calves of the control group were negative. At 60 dav, 80% of the calves in the vaccinated group were positive to ELISA and two animals in the control group were suspect. PCR revealed the presence of A. centrale at 60 dav, not only in the three calves of the vaccinated group but also in three animals of the control group. The latter could be attributed to horizontal transmission by iatrogenesis or through vectors. A. marginale was not identified. The lack of detection of specific antibodies at 60 dav in two vaccinated calves, not analyzed by PCR, could correspond to a longer incubation period, and later controls should have been performed. It is concluded that the cryopreserved monovalent vaccine of A. centrale confers an adequate immunity for the prophylaxis of anaplasmosis in calves, thus being a valid alternative for those establishments of tick-free zones. Absence of A. marginale as well as horizontal transmission of the vaccine strain were confirmed.