Propuesta y evaluación de una técnica de sedimentación y tinción con azul de metileno (y de una variante) para el diagnóstico de Fasciola hepática = Proposal and evaluation of a sedimentation and methylene blue staining technique(and a variant) for the diagnosis of Fasciola hepatica.

Abstract

La fasciolosis es uno de los mayores problemas sanitarios de origen parasitario en los rumiantes del Noroeste argentino. Varias de las técnicas diagnósticas coprológicas para Fasciola hepatica adolecen de poca sensibilidad, de ser muy complejas e insumir mucho tiempo. Esta comunicación describe y evalúa dos métodos coprológicos alternativos para el diagnóstico de F. hepatica mediante su comparación con otras técnicas previamente descriptas. El primero de ellos, denominado de sedimentación y tinción con Azul de Metileno (SAM) es de fácil lectura y al no emplear sales saturadas, está libre del inconveniente de deformar los huevos de F. hepatica en forma prematura. Este método reduce los sedimentos a través de sucesivos tamizados y contrasta claramente los huevos no teñidos (de color amarillento) con el resto de los detritos teñidos de azul. El segundo método, una variante del SAM, llamadode “recupero del Mc Master” (RMM), sigue los pasos del primero pero partiendo de material recuperado del sobrante del diagnóstico del recuento de huevos por gramo. El recupero tiene la ventaja de permitir un diagnóstico coprológico completo cuando las heces recibidas son de escaso volumen, hecho habitual en pequeños rumiantes. El resultado de ambos métodos es cuantitativo y hace referencia al número de huevos de F. hepatica por gramo de heces. Para evaluarlos se los comparó con tres técnicas de sedimentación como la de Dennis et al. (1954) descripta por el CICV del INTA Castelar (CICV), la misma técnica modificada por el Laboratorio de Servicio de Lucha Sanitaria (SELSA) y la técnica utilizada por el Laboratorio de Parasitología de la EEA-Bariloche. Se procesaron muestras individuales de heces provenientes de 29 animales (bovinos, ovinos y caprinos) de rebaños infestados con F. hepatica. Los resultados se analizaron mediante la prueba no paramétrica de Kruskal Wallis. Con las técnicas propuestas el promedio de huevos de F. hepática por gramo (Fpg) contados con SAM (Fpg= 30,06) y RMM (Fpg= 27,59) fueron mayores (p<0,001) que los registrados con las de CICV (Fpg= 1,88) y SELSA (Fpg= 2,29). La comparación de los resultados del análisis con SAM (Fpg= 28,0) y la técnica de la EEA Bariloche (Fpg= 19,10) no mostró diferencias significativas (p<0,17). Estos resultados muestran una muy buena sensibilidad de los dos métodos propuestos, además de otras ventajas sobre las restantes técnicas evaluadas.

Fasciolosis is one of the major parasitic health problems in ruminants in northwestern Argentina. Several coprological techniques for the diagnosis of Fasciola hepatica are characterized by being of low sensitivity, highly complex and time-consuming. The present work describes and evaluates two alternative coprological methods for the diagnosis of F. hepatica by comparing them with other previously described techniques. One of them, denominated sedimentation and staining with methylene blue (SMB) is easy to visualize and does not distort the F. hepatica eggs prematurely because it does not require the use of saturated salts. This method reduces the sediments through repeated sieving and provides a clear contrast of non-stained eggs (yellowish) from the remaining blue-stained detritus. The other method, a variant of SMB, called “recovery from McMaster” (RMM), includes the steps of SMB but using the material recovered from the material remaining from egg counts per gram. The recovery has the advantage of allowing a complete coprological diagnosis when a small volume of feces is evaluated, which is typical in small ruminants. Both methods yield quantitative results and provide the number of F. hepatica eggs per feces gram. The methods were compared using three sedimentation techniques: that of Dennis et al. (1954) described by CICV from INTA Castelar (CICV), the same technique modified by the Laboratorio de Servicio de Lucha Sanitaria (SELSA) and the technique used by the Laboratorio de Parasitología at EEA-Bariloche. Fecal samples from 29 animals (cattle, sheep and goat) from herds infested with F. hepatica were individually processed. Results were analyzed using the non-parametric Kruskal Wallis test. Mean eggs of F. hepatica per gram (Fpg) counted with SMB (Fpg= 30.06) and RMM (Fpg= 27.59) were higher (p<0.001) than those recorded with CICV (Fpg= 1.88) and SELSA (Fpg= 2.29). No significant differences (p<0.17) were detected by comparing the results of SMB analysis (Fpg= 28.0) and that of EEA Bariloche (Fpg= 19.10). The present results show a very good sensitivity of the two proposed methods, as well as other advantages over the remaining evaluated techniques.